DNA合成儀原理
 
 DNA合成儀的固相合成原理
 即DNA3‘端固定于基質(zhì)上,然后沿3‘向5‘方向依此添加核苷酸直至合成所需的DNA片段。不同于應(yīng)用DNA聚合酶的DNA合成。
 
 DNA合成儀的合成過程
 一個堿基的3‘末端固定在樹脂上,下一個堿基的5’-OH用二對甲氧三苯甲基DMT保護,堿基上的氨基用苯甲酸保護,美國PolyPlex引物合成儀,然后對3‘-OH用氨基磷酸化合物進行活化。
 1.1個堿基的5’-OH和下個堿基的3‘-OH形成亞磷酸三酯,
 2.然后用碘氧化成磷酸三酯
 3.加入CHCl2COOH除去第二個堿基5’-OH上的保護劑DMT
 循環(huán)進行加入下一個堿基
 
 
 DNA合成儀合成完畢后
 1.用苯硫酚除去5’-OH上的保護劑DMT
 2.用濃氫氧化銨將片段與固體樹脂斷開,洗脫
 3.用濃氫氧化銨在加熱的條件下除去堿基上的保護劑
 4.除去氫氧化銨,真空抽干
 5.液相色譜或者PAGE,回收片段長的。
 DNARNA核酸合成儀設(shè)計用于合成結(jié)構(gòu)上類似DNA或RNA的寡核苷酸的自動化儀器。一般應(yīng)用于固相合成法,每次將一個核苷酸加到所接長的寡核苷酸鏈上,加入每一個核苷酸都利用相同的化學(xué)反應(yīng)與相應(yīng)的嘌呤或嘧啶堿基衍生物作用。所用化學(xué)反應(yīng)和操作細節(jié)隨不同的儀器而改變,廣泛應(yīng)用的方法是DNA合成的磷酸酰胺法。
 OLIGOMAKER工業(yè)級DNARNA核酸合成儀專為合成較少寡核苷酸序列的客戶為設(shè)計,48柱機型共有48個合成柱,可在2.5小時內(nèi)一次性合成48條產(chǎn)物(20mer),可配置6,8,10,15個堿基瓶位,可適配1L,2.5L或更大的試劑瓶,廣州誠技商貿(mào)有限公司,誠技商貿(mào),合成范圍為10nmol—1umol。除常規(guī)合成外,還可進行修飾,熒光標記,硫代等多種特殊合成,滿足客戶不同需求。同時,OLIGOMAKER48工業(yè)級DNARNA核酸合成儀還支持快速合成,可在2小時之內(nèi)快速合成10條產(chǎn)物(20mer)。
 
 DNARNA核酸合成儀技術(shù)參數(shù):
 (1) 合成柱數(shù):具有48個合成忄柱,可同時合成48種相同或不同、相同長度或不同長度低聚核苷酸。
 (2) 合成速度:2.5小時內(nèi)可合成48個產(chǎn)物(20mer),2小時內(nèi)可合成10個產(chǎn)物(20mer)
 (3) 堿基瓶位:6個堿基瓶位,可升級至8個,10個,多可支持15個堿基瓶位。
 (4) 試劑瓶位:支持1,美國PolyPlex引物合成儀,2.5L試劑瓶。
 (5) 溶劑消耗:合成過程中無需反復(fù)沖洗試劑管道,每個循環(huán)溶劑消耗量少于1ml。
 (6) 合成柱種類:支持預(yù)裝填柱及自裝填柱。
 (7) 合成柱承載方式:盤式。
 (8) 合成產(chǎn)物種類:可DNA,RNA,LNA,硫代,修飾,熒光標記等。
 
 DNARNA核酸合成儀性能特點:
 (1) 合成范圍:10nmol,50nm肀ol,200nmol,1umol。
 (2) 合成效率:10nmol合成范圍,純化后產(chǎn)物可達2OD;50nmol合成范圍純化后產(chǎn)物可高達5OD。
 (3) 合成產(chǎn)物長度:多100bp。
 (4) 耦合率:DNA≥99%。
 (5) 產(chǎn)品兼容性:同一主機兼容48,96,192柱合成盤,購買相應(yīng)合成盤即可升級為96柱,192柱。
 進口OligoMakerDNARNA引物核酸合成儀是靈活性極高的合成智能解決系統(tǒng)。同一臺儀器可以獲得不同的合成方案,客戶能夠根據(jù)自己實驗室的具體要求設(shè)計自己獨有的核甘酸合成儀方案。
 l.標準配置包括6個標準的堿基單體,儀器硬件易于操作,只需將反應(yīng)板放在儀器中,便可開始合成。維護簡單快捷。更換管子或閥門很容易,因為它們被放在儀器的前面。使用標準的3900型柱。柱體可以是具有松散CPG的開放柱體,也可以有底部和頂部過濾器或封閉柱體。
 l在引物模式下,你可以獨立引發(fā)每種單體試劑,同時檢查所有試劑噴嘴。或者,您可以用觸摸屏來控制引發(fā)所有單體試劑。
 l如果閥門發(fā)生故障,多余的試劑將自動排出,不會損壞儀器。
 l通過CE認證,并且噪音低于70分貝。
 l內(nèi)包裝65x55x55cm,凈重55kg外包裝80x60x75cm,90kg。
 軟件l包括一個靈活的合成協(xié)議編輯器,它允許操作員修改所包含的協(xié)議,并將它們保存在一個新名稱下,或者從頭開始編寫協(xié)議。協(xié)議編輯可以在Excel中完成。對于不同的合成規(guī)模和序列長度,很容易編輯特殊協(xié)議。比如,可以給耦合緩慢的堿基對一個特別的延長的耦合時間。如果必要的話,可以給所有單體額外的耦合反應(yīng)時間。軟件簡單易用。在計算機或平板的Excel表中創(chuàng)建運行數(shù)據(jù)后,可使用Wi-Fi等網(wǎng)絡(luò)連接或標準U盤傳輸?shù)絻x器上。實驗運行中,可以從PC端收集實驗數(shù)據(jù)監(jiān)測實驗結(jié)果。
 
 性能
 OligoMakerX12可以在1小時內(nèi)平行合成12條20對的寡核苷酸。    
 OligoMaker48可以在2小時內(nèi)平行合成多達48條20對的寡核苷酸。
 OligoMaker96可以在3小時內(nèi)平行合成多達96條20對的寡核苷酸。
 OligoMaker192可以在4小時內(nèi)平行合成多達192條20對的寡核苷酸。進口OligoMakerDNARNA引物核酸合成儀可在IUPAC-IUB標準規(guī)則下合成10、50、200和1000nmol規(guī)模的核苷酸。
 
 兩個反應(yīng)盤,一個盤可以加載和合成核苷酸,另一個盤準備進行凈化步驟。
 OligoMaker48可以升級為OligoMaker96和OligoMaker192;
 OligoMaker96可以升級為OligoMaker192。
 
 符合IUPAC-IUB標準規(guī)則
 
 
 自動化脫保護基配件
 我們提供的設(shè)備可以協(xié)助核苷酸脫保護自動化儀器系統(tǒng)的支架。所有產(chǎn)品均為微孔板,由陽極氧化鋁制成(這些配件不包括在標配中)。
 OM-96-001-VM
 OM-96-005-VM
 OM-96-020-DP
 
 RPC純化配件
 用于純化的裝置和可重復(fù)使用的RPC柱(這些配件不包括在標配中)。
 OM-96-002-RPC
 OM-96-006-PRC
 OM-96-010-RPC
 OM-96-100-RPC
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