實(shí)驗(yàn)原理及目的
染色質(zhì)免疫共沉淀(ChromatinImmunoprecipitation,ChIP)是目前研究體內(nèi)DNA與蛋白質(zhì)相互作用最為主要的方法之一。本實(shí)驗(yàn)的原理是在活細(xì)胞狀態(tài)下通過化學(xué)交聯(lián)劑將蛋白質(zhì)-DNA復(fù)合物固疋定,并將其隨機(jī)打斷成一定長度范圍內(nèi)的染色質(zhì)小片段,然后通過免疫學(xué)的方法沉淀出目的蛋白質(zhì)-DNA復(fù)合體,.淳風(fēng)生物科技___r西寧染色質(zhì)免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)
,從而特異性地富集與目的蛋白相結(jié)合的DNA片段。通過對目的DNA片斷的純化與檢測,最終獲得蛋白質(zhì)與DNA相互作用的信息。染色質(zhì)免疫共沉淀技術(shù)廣泛的應(yīng)用于表觀遺傳(組蛋白等)分析,轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)分析等蛋白質(zhì)與DNA結(jié)合的試驗(yàn)分析中。隨著第二代測序技術(shù)的逐步完善和成熟,染色質(zhì)免疫共沉淀結(jié)合第二代高通量測序技術(shù)(ChIP-seq)正逐步成為基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò)研究中一種非常有效的研究手段。
 
實(shí)驗(yàn)步驟
A]實(shí)驗(yàn)材料的交聯(lián)處理(室溫):
B]實(shí)驗(yàn)材料的染色質(zhì)抽提(4度):
C]染色質(zhì)的超聲波片段化(4度):
D]染色質(zhì)前處理和免疫共沉淀(4度):
孵育抗體和磁珠
染色質(zhì)的預(yù)處理
免疫沉淀
E]洗脫蛋白質(zhì)-DNA復(fù)合物并釋放DNA(4度):
F]純化DNA(室溫):
G]對ChIPDNA進(jìn)行定量:
 
結(jié)果分析:
%Input=2(CtInput-CtChIP)×Fd×100%;
FoldEnrichment=[%(ChIP/Input)]/[%(Negativecontrol/Input)]
服務(wù)周期
20個工作日
材料條件
實(shí)驗(yàn)材料:ChIP級抗體,5ug/樣本;
細(xì)胞:大于107;
動物組織:大于0.1g/樣本;
植物組織:5g/樣本。
 
交付結(jié)果
實(shí)驗(yàn)報(bào)告(實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備、試劑、實(shí)驗(yàn)方法、數(shù)據(jù)分析結(jié)果);
實(shí)驗(yàn)原理及目的
染色質(zhì)免疫共沉淀(ChromatinImmunoprecipitation,ChIP)是目前研究體內(nèi)DNA與蛋白質(zhì)相互作用最為主要的方法之一。本實(shí)驗(yàn)的原理是在活細(xì)胞狀態(tài)下通過化學(xué)交聯(lián)劑將蛋白質(zhì)-DNA復(fù)合物固定,并將其隨機(jī)打斷成一定長度范圍內(nèi)的染色質(zhì)小片段,然后通過免疫學(xué)的方法沉淀出目的蛋白質(zhì)-DNA復(fù)合體,從而特異性地富集與目的蛋白相結(jié)合的DNA片段。通過對目的DNA片斷的純化與檢測,最終獲得蛋白質(zhì)與DNA相互作用的信息。染色質(zhì)免疫共沉淀技術(shù)廣泛的應(yīng)用于表觀遺傳(組蛋白等)分丬析,轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)分析等蛋白質(zhì)與DNA結(jié)合的試驗(yàn)分析中。隨著第二代測序技術(shù)的逐步完善和成熟,染色質(zhì)免疫共沉淀結(jié)合第二代高通量測序技術(shù)(ChIP-seq)正逐步成為基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò)研究中一種非常有效的研究手段。
 
實(shí)驗(yàn)步驟
A]實(shí)驗(yàn)材料的交聯(lián)處理(室溫):
B]實(shí)驗(yàn)材料的染色質(zhì)抽提(4度):
C]染色質(zhì)的超聲波片段化(4度):
D]染色質(zhì)前處理和免疫共沉淀(4度):
孵育抗體和磁珠
染色質(zhì)的預(yù)處理
免疫沉淀
E]洗脫蛋白質(zhì)-DNA復(fù)合物并釋放DNA(4度):
F]純化DNA(室溫):
G]對ChIPDNA進(jìn)行定量:
 
結(jié)果分析:
%Input=2(CtInput-CtChIP)×Fd×100%;
FoldEnrichment=[%(ChIP/Input)]/[%(Negativecontrol/Input)]
服務(wù)周期
20個工作日
材料條件
實(shí)驗(yàn)材料:ChIP級抗體,.淳風(fēng)生物科技___r西寧染色質(zhì)免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)
,5ug/樣本;
細(xì)胞:大于107;
動物組織:大于0.1g/樣本;
植物組織:5g/樣本。
 
交付結(jié)果
實(shí)驗(yàn)報(bào)告(實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備、試劑、實(shí)驗(yàn)方法、數(shù)據(jù)分析結(jié)果);
實(shí)驗(yàn)原理及目的
染色質(zhì)免疫共沉淀(ChromatinImmunoprecipitation,ChIP)是目前研究體內(nèi)DNA與蛋白質(zhì)相互作用最為主要的方法之一。本實(shí)驗(yàn)的原理是在活細(xì)胞狀態(tài)下通過化學(xué)交聯(lián)劑將蛋白質(zhì)-DNA復(fù)合物固定,西安淳風(fēng)生物科技有限公司,淳風(fēng)生物科技,并將其隨機(jī)打斷成一定長度范圍內(nèi)的染色質(zhì)小片段,然后通過免疫學(xué)的方法沉淀出目的蛋白質(zhì)-DNA復(fù)合體,從而特異性地富集與目的蛋白相結(jié)合的DNA片段。通過對目的DNA片斷的純化與檢測,最終獲得蛋白質(zhì)與DNA相互作用的信息。染色質(zhì)免疫共沉淀技術(shù)廣泛的應(yīng)用于表觀遺傳(組蛋白等)分析,轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點(diǎn)分析等蛋白質(zhì)與DNA結(jié)合的試驗(yàn)分析中。隨著第二代測序技術(shù)的逐步完善和成熟,染色質(zhì)免疫共沉淀結(jié)合第二代高通量測序技術(shù)(ChIP-seq)正逐步成為基因調(diào)控網(wǎng)絡(luò)研究中一種非常有效的研究手段。
 
實(shí)驗(yàn)步驟
A]實(shí)驗(yàn)材料的交聯(lián)處理(室溫):
B]實(shí)驗(yàn)材料的染色質(zhì)抽提(4度):
C]染色質(zhì)的超聲波片段化(4度):
D]染色質(zhì)前處理和免疫共沉淀(4度):
孵育抗體和磁珠
染色質(zhì)的預(yù)處理
免疫沉淀
E]洗脫蛋白質(zhì)-DNA復(fù)合物并釋放DNA(4度):
F]純化DNA(室溫):
G]對ChIPDNA進(jìn)行定量:
 
結(jié)果分析:
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服務(wù)周期
20個工作日
材料條件
實(shí)驗(yàn)材料:ChIP級抗體,5ug/樣本;
細(xì)胞:大于107;
動物組織:大于0.1g/樣本;
植物組織:5g/樣本。
 
交付結(jié)果
實(shí)驗(yàn)報(bào)告(實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備、試劑、實(shí)驗(yàn)方法、數(shù)據(jù)分析結(jié)果);
.淳風(fēng)生物科技___r西寧染色質(zhì)免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)
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