實驗原理及目的
染色質免疫共沉淀(ChromatinImmunoprecipitation,ChIP)是目前研究體內DNA與蛋白質相互作用最為主要的方法之一。本實驗的原理是在活細胞狀態(tài)下通過化學交聯劑將蛋白質-DNA復合物固定,并將其隨機打斷成一定長度范圍內的染色質小片段,然后通過免疫學的方法沉淀出目的蛋白質-DNA復合體,從而特異性地富集與目的蛋白相結合的DNA片段。通過對目的DNA片斷的純化與檢測,南寧染色質免疫共沉淀技術服務
,最終獲得蛋白質與DNA相互作用的信息。染色質免疫共沉淀技術廣泛的應用于表觀遺傳(組蛋白等)分析,轉錄因子結合位點分析等蛋白質與DNA結合的試驗分析中。隨著第二代測序技術的逐步完善和成閂熟,西安淳風生物科技有限公司,淳風生物科技,染色質免疫共沉淀結合第二代高通量測序技術(ChIP-seq)正逐步成為基因調控網絡研究中一種非常有效的研究手段。
 
實驗步驟
A]實驗材料的交聯處理(室溫):
B]實驗材料的染色質抽提(4度):
C]染色質的超聲波片段化(4度):
D]染色質前處理和免疫共沉淀(4度):
孵育抗體和磁珠
染色質的預處理
免疫沉淀
E]洗脫蛋白質-DNA復合物并釋放DNA(4度):
F]純化DNA(室溫):
G]對ChIPDNA進行定量:
 
結果分析:
%Input=2(CtInput-CtChIP)×Fd×100%;
FoldEnrichment=[%(ChIP/Input)]/[%(Negativecontrol/Input)]
服務周期
20個工作日
材料條件
實驗材料:ChIP級抗體,5ug/樣本;
細胞:大于107;
動物組織:大于0.1g/樣本;
植物組織:5g/樣本。
 
交付結果
實驗報告(實驗儀器設備、試劑、實驗方法、數據分析結果);
實驗原理及目的
染色質免疫共沉淀(ChromatinImmunoprecipitation,ChIP)是目前研究體內DNA與蛋白質相互作用最為主要的方法之一。本實驗的原理是在活細胞狀態(tài)下通過化學交聯劑將蛋白質-DNA復合物固勹定,并將其隨機打斷成一定長度范圍內的染色質小片段,然后通過免疫學的方法沉淀出目的蛋白質-DNA復合體,從而特異性地富集與目的蛋白相結合的DNA片段。通過對目的DNA片斷的純化與檢測,最終獲得蛋白質與DNA相互作用的信息。染色質免疫共沉淀技術廣泛的應用于表觀遺傳(組蛋白等)分析,轉錄因子結合位點分析等蛋白質與DNA結合的試驗分析中。隨著第二代測序技術的逐步完善和成熟,染色質免疫共沉淀結合第二代高通量測序技術(ChIP-seq)正逐步成為基因調控網絡研究中一種非常有效的研究手段。
 
實驗步驟
A]實驗材料的交聯處理(室溫):
B]實驗材料的染色質抽提(4度):
C]染色質的超聲波片段化(4度):
D]染色質前處理和免疫共沉淀(4度):
孵育抗體和磁珠
染色質的預處理
免疫沉淀
E]洗脫蛋白質-DNA復合物并釋放DNA(4度):
F]純化DNA(室溫):
G]對ChIPDNA進行定量:
 
結果分析:
%Input=2(CtInput-CtChIP)×Fd×100%;
FoldEnrichment=[%(ChIP/Input)]/[%(Negativecontrol/Input)]
服務周期
20個工作日
材料條件
實驗材料:ChIP級抗體,南寧染色質免疫共沉淀技術服務
,5ug/樣本;
細胞:大于107;
動物組織:大于0.1g/樣本;
植物組織:5g/樣本。
 
交付結果
實驗報告(實驗儀器設備、試劑、實驗方法、數據分析結果);
實驗原理及目的
染色質免疫共沉淀(ChromatinImmunoprecipitation,ChIP)是目前研究體內DNA與蛋白質相互作用最為主要的方法之一。本實驗的原理是在活細胞狀態(tài)下通過化學交聯劑將蛋白質-DNA復合物固定,并將其隨機打斷成一定長度范圍內的染色質小片段,然后通過免疫學的方法沉淀出目的蛋白質-DNA復合體,從而特異性地富集與目的蛋白相結合的DNA片段。通過對目的DNA片斷的純化與檢測,最終獲得蛋白質與DNA相互作用的信息。染色質免疫共沉淀技術廣泛的應用于表觀遺傳(組蛋白等)分析,轉錄因子結合位點分析等蛋白質與DNA結合的試驗分析中。隨著第二代測序技術的逐步完善和成熟,染色質免疫共沉淀結合第二代高通量測序技術(ChIP-seq)正逐步成為基因調控網絡研究中一種非常有效的研究手段。
 
實驗步驟
A]實驗材料的交聯處理(室溫):
B]實驗材料的染色質抽提(4度):
C]染色質的超聲波片段化(4度):
D]染色質前處理和免疫共沉淀(4度):
孵育抗體和磁珠
染色質的預處理
免疫沉淀
E]洗脫蛋白質-DNA復合物并釋放DNA(4度):
F]純化DNA(室溫):
G]對ChIPDNA進行定量:
 
結果分析:
%Input=2(CtInput-CtChIP)×Fd×100%;
FoldEnrichment=[%(ChIP/Input)]/[%(Negativecontrol/Input)]
服務周期
20個工作日
材料條件
實驗材料:ChIP級抗體,5ug/樣本;
細胞:大于107;
動物組織:大于0.1g/樣本;
植物組織:5g/樣本。
 
交付結果
實驗報告(實驗儀器設備、試劑、實驗方法、數據分析結果);
.淳風生物科技///南寧染色質免疫共沉淀技術服務