采用生物滅菌指示劑來檢查壓力蒸汽滅菌效果是最科學、最可靠的監測方法。由中國預防醫學科學院流行病微生物研究所生產,北京鑫四環消毒技術開發中心分裝銷售的嗜熱脂肪桿菌芽孢(SS1,K31)是國際公認的標準菌株。現制成標準菌片,供檢查壓力蒸汽滅菌效果檢測。
菌株特點:
1、該菌為需氧芽孢桿菌,細菌繁殖體G蘭氏染色陰性呈紫色,細菌芽胞孔雀綠著色。其細菌繁殖體對培養基要求低,在溴甲酚紫葡萄糖蛋白胨瓊脂上生長良好,表面粗糙呈米黃色。
2、最適生長繁殖濕度為56-65℃,培養24h即可形成菌落,37℃下24h看不到菌落。
3、本生物指示劑載體為高級濾紙片,染菌量為5×105-106cfu/片,封裝在小紙袋內,熱死亡時間為121℃,3.9 min陽性,19 min陰性;D10值1.3-1.9 min,符合美國藥典第十一版規定標準。
4、該菌無毒,熱抗穩定,在冰箱內4℃下保存一年抗力無明顯下降,在常溫(20℃左右)可保存1個月。
使用方法:
1、該芽孢菌片使用時將裝有菌片的小紙袋放在被滅菌的物品中心部位(每鍋放置菌片數按衛生部規定)。
2、滅菌后,再無菌操作下取出小紙袋中的菌片,放到溴甲酚紫培養液管中。同時將未經滅菌的菌片投入另一管培養基中作對照。
3、 56℃-60℃培養,48h觀察結果,對照管為米黃色;若滅菌片培養液顏色不變仍為淡紫色,為陰性(-),表示滅菌徹底;如變黃為陽性(+),表示滅菌不徹底。
培養基成分和配制方法:
1、成分:胰蛋白胨10g、葡萄糖5g、蒸餾水1000ml、1.6%溴甲酚紫酒精溶液指示劑1ml。
2、配制方法:
(1)1.6g溴甲酚紫溶于98.4ml的96%酒精溶液中搖勻;
(2)把前三種成分溶解后,調解PH7.0-7.2,加入指示劑,搖勻;
(3)每管分裝5ml,以121℃20min滅菌后,放4℃冰箱內保存,備用。
注意事項:
1、防止指示劑中酒精揮發而使溴甲酚紫含量過高(溴甲酚紫含量過高后可抑菌生長);
2、菌片滅菌后應及時取出培養;
3、禁止菌片接觸任何消毒劑及放射源以免影響抗力。