葉綠素儀是一款專用測定植物葉綠素含量的檢測儀器,該款儀器在各領域中均有廣泛的運用。葉綠素含量是反映植物特別是光合機構生理狀況的一個基本指標,植物生理研究中經常涉及葉綠素含量的測定。但如何測定葉綠素含量,迄今尚未見到一篇簡便方法的介紹。不少研究論文和實驗教材(中國科學院上海植物生理研究所和上海市植物生理學會;侯福林;藤利榮和孟慶繁;李玲中提到或介紹的測定方法一般都包括葉片稱重、研磨、沖洗、過濾和定容(25mL或更多)及稀釋等繁瑣步驟,既費時間,又費溶劑,不適于科學研究中大批量樣品的測定,特別是以葉片鮮重表示的葉綠素含量,不僅容易受葉片含水量變化的干擾,給測定結果帶來偏差,而且也不便于同以單位葉面積表示的光合速率聯系起來分析兩者的關系
使用葉綠素含量測定儀不少實驗教材中介紹的研磨過濾方法提取葉綠素,不僅費時間,從稱重到定容結束,1個樣品至少需要10min,而且由于不可避免的損失,所得到的結果一般會低一些;而用本文中的葉絲浸提法,不算浸提的等待時間,從取樣、切細到投入80%丙酮浸提的操作時間一般不超過1 ̄2min,而且可以避免過濾造成的損失(圖1)。從用兩種方法測定的結果可以看到,用葉絲浸提法得到的葉綠素提取液可以直接用于比色測定光密度,不需要過濾或離心(圖2)。雖然在用葉片細絲的浸提液中含有少浸出物的雜質,但由于其對比色波長的光沒有明顯的吸收,所以測定的結果受到的影響并不明顯。眾所周知,由于自然條件下光強、氣溫和土壤水分狀況及葉片蒸騰作用的變化,葉片的含水量在一天內的不同時刻會明顯不同,特別是在遭遇干旱或水分脅迫處理時,處理和對照葉片的含水量會明顯不同。在這種情況下,以單位葉片鮮重表示葉綠素含量會造成導致錯誤結論的假象。圖3結果清楚地說明了這個問題:雖然以單位葉面積表示的葉綠素含量是一樣的,可是在以單位葉片鮮重表示時,那些含水量高的葉片葉綠素含量明顯降低。
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