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廣州輝駿生物科技股份有限公司

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[供應]親和純化/質譜Affinity purification,AP/MS
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  • 產品產地:廣州
  • 產品品牌:輝駿生物
  • 包裝規格:B007
  • 產品數量:999
  • 計量單位:個
  • 產品單價:1
  • 更新日期:2024-03-21 10:30:56
  • 有效期至:2034-03-19
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親和純化/質譜Affinity purification,AP/MS 詳細信息

實驗目的:尋找靶蛋白的互作蛋白
 

AP/MS服務簡介:
       與常規Co-IP實驗類似,只是親和純化法可不用引入抗體。將標簽(如SBP)與特定基因融合表達,融合蛋白用鏈霉親和素(strep)磁珠親和純化,經生物素洗脫,即可得到蛋白復合物。將實驗組和對照組的洗脫蛋白分別做質譜,在實驗組結果中扣除對照組中的蛋白,即可鑒定出與靶蛋白互作的蛋白。



AP/MS技術優勢:
 1、得到的互作蛋白是細胞內與誘餌蛋白天然互作的,符合體內真實生理情況,可信度高;
 2、不用抗體“拉取”互作蛋白復合物,避免了抗體的污染;
 3、所得洗脫液可直接酶解,進行質譜,減少了跑膠引起的蛋白損失。



服務內容:
 1、構建含SBP標簽的靶基因表達載體質粒;
 2、目的細胞中過表達帶標簽的誘餌蛋白,細胞裂解液做WB檢測表達效果;
 3、用strep微珠進行蛋白復合物的純化和洗脫;
 4、實驗組和對照組的洗脫液分別用胰酶酶解;
 5、LC-MS/MS,獲得蛋白質的定性信息;
 6、結果分析與報告整理。



技術流程圖:


服務項目客戶提供結果交付實驗周期AP/MS1、誘餌基因的名稱、序列、物種等相關信息或誘餌基因的cDNA模板等
2、待研究的細胞(保證細胞狀態良好,易于用質粒轉染)及其培養相關信息1、構建好的真核表達載體
2、實驗組和對照組蛋白的質譜鑒定結果
3、數據分析結果預計2-2.5個月

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