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[供應]siRNA載體構建實驗服務
- 產品產地：廣州
- 產品品牌：輝駿生物
- 包裝規格：D003
- 產品數量：0
- 計量單位：
- 產品單價：0
- 更新日期：2024-07-22 15:18:08
- 有效期至：2034-07-20
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siRNA載體構建實驗服務
詳細信息
一、siRNA載體構建概述
RNA干擾（RNAi）是一種運用雙鏈RNA(dsRNA)分子實現基因的沉默，在植物和動物中都廣泛存在的一種基因調控機制。導入細胞內的雙鏈RNA在Dicer酶的作用下形成21-23核甘酸長siRNA，siRNA雙鏈結合一個核酶復合物從而形成RNA誘導沉默復合物(RNA-inducedsilencingcomplex，RISC)與mRNA結合誘導mRNA切割，從而調節基因的表達。其應用于包括功能基因組學、藥物作用靶點篩選和細胞信號通路等研究中，并且逐步成為病毒性疾病、遺傳性疾病以及腫瘤等的基因治療研究的一種手段。
圖1：siRNA作用機制
本公司siRNA載體技術服務的基本原理就是將表達siRNA的雙鏈DNA插入到啟動子下面，導入細胞后，啟動子啟動siRNA的表達并在Dicer核糖核酸酶的作用下產生具有活性的siRNA。
二、目前siRNA的來源主要包括化學合成，體外轉錄，siRNA載體（質粒載體或病毒載體）等，siRNA載體與其他方法相比，具有以下技術優勢：
1、siRNA載體是DNA，與RNA相比更加穩定，易控制。
2、含有GFP的siRNA載體可以更好的監測轉染效率。
3、siRNA載體上帶有篩選標簽及篩選抗性基因，可用于穩定細胞系的建立。
三、技術服務內容
1、siRNA載體的選擇：本公司的siRNA載體分為質粒載體和病毒載體，同時載體上帶有GFP及篩選抗性基因可供選擇。
2、設計siRNA序列：根據目的mRNA序列設計三條siRNA序列及陰性對照序列。
3、模板合成：合成每條編碼siRNA的單鏈DNA模板，退火形成DNA雙鏈。模板鏈后面連接RNAPolyIII聚合酶轉錄終止位點，且兩端分別設計酶切位點。
4、空載體和模板酶切，連接、轉化及克隆鑒定。
5、siRNA載體技術服務報告提交.
四、客戶提供：
靶基因的mRNA序列、NCBI登陸號及所屬物種等與構建siRNA載體相關的信息。
五、實驗服務報告內容
1、siRNA載體及含該質粒的細菌各一份；
2、載體圖譜、測序結果各一份；
3、siRNA載體技術服務所需試劑耗材、儀器設備、操作過程各一份；
六、實驗服務周期及收費標準：咨詢本公司
七、質量承諾：保證構建的siRNA載體沉默效率大于70%
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